EnteroPluri®-Test, galería de identificación de enterobacterias

EnteroPluri®-Test, galería de identificación de enterobacterias



MicroPlanet les ofrece las mejores herramientas para el análisis microbiológico, aplicado tanto al control de calidad industrial como al diagnóstico clínico. Hasta ahora, uno de los históricos sistemas tradicionales de identificación fue el Enterotube de Becton Dickinson. Actualmente, ha sido re-bautizado como EnteroPluri® Test, panel de identificación de enterobacteriasLa inoculación simultánea en un mismo tubo, sobre diferentes medios de cultivo que producen reacciones bioquímicas específicas, permite realizar un análisis rápido y sencillo con resultados definitivos.

 

EnteroPluri®-Test: una solución sencilla y rápida para identificación de enterobacterias

EnteroPluri®-Test es un producto fabricado por Liofilchem srl. Consiste en una minipanel de identificación con 12 sectores que contienen medios de cultivo diferenciales para identificar Enterobacteriaceae y otras bacterias gramnegativas, oxidasas negativas aisladas de un agar de cultivo.

El panel permite una inoculación sencilla y rápida de cada uno de los sectores. En los cultivos de crecimiento incluidos, consigue reproducir hasta 15 reacciones bioquímicas diferenciales. El microorganismo se identifica evaluando el cambio de color de los distintos medios de cultivo tras 18-24 horas de incubación a 36°C ± 1°C y mediante un código numérico obtenido a partir de la interpretación de las reacciones bioquímicas.

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La patente original del sistema de Becton Dickinson, multinacional estadounidense que lo comercializó inicialmente con el nombre de "Enterotube" y posteriormente "Enterotube II", se introdujo rápida y exitosamente sobre todo en el sector hospitalario. 

Permitía unificar una serie de test independientes en forma de batería rápida, que optimizaba los tiempos en el laboratorio de microbiología. Cuando venció la patente, BD cedió la producción a Liofilchem.  Actualmente es quien lo fabrica y comercializa con el nombre de EnteroPluri®-Test.

Principio del método: medios específicos para cada test

A partir de una colonia pura sospechosa, aislada en placa, este método microbiológico permite identificar enterobacterias y otras bacterias gramnegativas, procedentes de muestras clínicas o de cualquier origen (aguas, alimentos, etc.). La identificación se basa en pruebas bioquímicas realizadas en medios de cultivo selectivos que contienen sustratos específicos y diferenciales.

La combinación de las reacciones positivas y negativas genera un código numérico que, a su vez, permite identificar, con la ayuda del Manual de Códigos, las bacterias examinadas. El manual de códigos se suministra gratuitamente a nuestros clientes. Contacte con nosotros sino dispone de un libro de códigos para la interpretación de resultados.

¿Para qué se utiliza EnteroPluri®-Test?

Como hemos comentado, EnteroPluri®-Test se utiliza para identificar bacterias gramnegativas, oxidasas negativas aisladas en agares de cultivo selectivos para el aislamiento de la familia Enterobacteriaceae como: Mac Conkey Agar (MCA), Eosin Methylene Blue Agar (EMBA), Salmonella y Shigella Agar (SSA), Hektoen Enteric Agar (HEA) o en terrenos no selectivos.

En la tabla siguiente encontrará los medios de cultivo de los 12 sectores incluidos y las reacciones bioquímicas que se realizan en cada uno de ellos:

SECTORES REACCCIÓN BIOQUÍMICA
Glucosa / Gas Fermentación de la glucosa y producción de gas en anaerobiosis
Lisina Descarboxilación de la lisina en anaerobiosis
Ornitina Descarboxilación de la ornitina en anaerobiosis
H2S / H2Indol Producción de sulfuro de hidrógeno (ácido sulfhídrico) y producción de indol
Adonitol Fermentación del adonitol
Lactosa Fermentación de la lactosa
Arabinosa Fermentación de la arabinosa
Sorbitol Fermentación del sorbitol
VP Producción de acetoína (acetil metil carbinol)  (test Voges-Proskauer)
Dulcitol / PA Fermentación del dulcitol y desaminación de la fenilalanina
Urea Hidrólisis de la urea
Citrato Utilización del citrato 


Modo de uso: fácil, cómodo, rápido y seguro

  1. Coger un tubo EnteroPluri®-Test y anotar en él: nombre de identificación de la muestra a identificar, la fecha de realización del test y otras informaciones que considere necesarias.
  2. 
Desenroscar ambos tapones (rojo y azul) del EnteroPluri®-Test.
  3. Con el extremo de la aguja correspondiente recoja una colonia bien aislada del medio de cultvo.
  4. Inocular el EnteroPluri®-Test, estirando la aguja por el extremo opuesto, girando a la vez la aguja de inoculación a través de los pocillos del panel para una perfecta inoculación. Reinsertar nuevamente la aguja hasta la muesca de fractura que aparece grabada y con un movimiento de torsión romper la aguja de inoculación por la muesca.EnteroPluriTest2
  5. La parte de la aguja que queda dentro del panel mantiene las condiciones anaerobias necesarias para las reacciones de la glucosa/del gas, de la lisina y de la ornitina de los diferentes sectores. EnteroPluriTest5
  6. Antes de desecharla, utilizar el trozo de aguja cortada de la aguja para perforar la película plástica en los sectores adonitol, lactosa, arabinosa, sorbitol, VP, Dulcitol/PA, urea y citrato, para crear las condiciones aeróbicas.EnteroPluriTest4
  7. Cerrar otra vez ambos extremos con los tapones e incubar el EnteroPluri®-Test a 36°C ± 1°C durante 18-24 horas, colocándolo verticalmente en una gradilla o bien en una superficie plana.EnteroPluriTest3
  8. Anotar los resultados obtenidos en la hoja de datos, para la obtención del código numérico de interpretación, excepto la prueba del Indol y de Voges-Proskauer.
  9. Inyectar con una jeringuilla 3 ó 4 gotas del reactivo de Kovac en el sector H2S/Indol. Igualmente inyectar 3 gotas del alfa-naftol y 2 gotas del hidróxido de potasio en el sector VP.
  10. Completar el código de 5 dígitos siguiendo las instrucciones e identificar finalmente la bacteria usando el Libro de Códigos.

EnteroPluriTest7EnteroPluriTest6       

Interpretación de los resultados

Una vez finalizada la incubación, se observa el cambio de color de los medios de los distintos sectores. A continuación, se pueden interpretar los resultados con la ayuda de la siguiente tabla:

SECTORES REACCIONES BIOQUÍMICAS COLOR SECTOR
Reacción positiva Reacción negativa
Glucosas / Gas Fermentación de la glucosa amarillo rojo
Producción de gases cera suelta cera adherida
Lisina Descarboxilación de la lisina violeta amarillo
Ornitina Descarboxilación de la ornitina violeta amarillo
H2S / Indol Producción de sulfuro de hidrógeno negro-marrón beige
Producción de indol rosa-rojo incoloro
Adonitol Fermentación adonitol amarillo rojo
Lactosa Fermentación lactosa amarillo  rojo
Arabinosa Fermentación arabinosa amarillo  rojo
Sorbitol Fermentación sorbitol amarillo  rojo

VP

Dulcitol / PA

Producción de acetoína rojo  incoloro 
Fermentación dulcitol amarillo verde
Desaminación de la fenilalanina marrón oscuro verde
Urea Hidrólisis de la urea púrpura beige
Citrato Utilización del citrato azul verde


Formación del código numérico

Los 15 test bioquímicos se dividen en 5 grupos que contienen 3 test y cada test se indica con un valor de positividad de 4,2,1.

  • Valor 4: primer test positivo de cada grupo (glucosa, ornitina, adonitol, sorbitol, PA).
  • Valor 2: segundo test positivo de cada grupo (gas, H2S, lactosa, VP, urea).
  • Valor 1: tercer test positivo de cada grupo (lisina, indol, arabinosa, dulcitol, citrato).
  • Valor 0: cada test negativo.

Sumando en cada grupo los números de las reacciones positivas, se obtiene un código de 5 cifras. Utilizando el Manual de los códigos, este número permite identificar el microorganismo en examen.

EnteroPluriTest1

En algún caso ocurre que el sector glucosa/gas no cambia de color mientras que en otros sectores sí. Esto se debe a que el microorganismo que se está examinando no pertenece a la familia de las Enterobacteriaceae. El Manual de Códigos también comprende muchos códigos de microorganismos que no fermentan la glucosa en anaerobiosis. En algunos casos pueden ser necesarias algunas reacciones químicas suplementarias para una identificación correcta de estos no fermentativos.

Cada estuche contiene 10 o 25 paneles de EnteroPluri®-Test, una hoja de instrucciones y un bloque de módulos para la recogida de los resultados de las reacciones bioquímicas.

Una herramienta de utilidad en su laboratorio

Tal vez sea en los laboratorios de control de calidad alimentarios y clínicos donde el EnteroPluri®-Test es más conocido y utilizado. Pero resulta igualmente útil en otros sectores como el biotecnológico, farmacéutico, cosmético, químico y medioambiental. Así como en universidades y centros de investigación donde los análsis realizados necesitan de una herramienta rápida y sencilla para la confirmación de enterobacterias. Igualmente, EnteroPluri®-Test se utiliza en docencia en las clases prácticas de microbiología como ejemplo de panel de identificación. 

¿Quiere ver un vídeo explicativo de la inoculación de Enteropluri Test? Una imagen vale más que mil palabras:

 

Liofilchem es uno de los proveedores principales de MicroPlanet. Si quiere conocer todos los productos Liofilchem que representamos, consulte nuestra página. Encontrará productos para identificación microbiana, medios de cultivo deshidratados, medios de cultivo preparados, laminocultivos, indicadores biológicos, seguridad antibiótica, cepas e inmunología.

Esperamos que le haya resultado útil esta exhaustiva presentación de EnteroPluri®-Test, galería de identificación de enterobacterias. Póngase en contacto con nosotros si necesita más información o cotización sobre éste u otros sistemas de identificación microbiológica para su laboratorio.

 

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